بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی اجزای پروتئینی آرتمیا اورمیانا در سیستم استرس اکسیداتیو نوتروفیل های خون محیطی انسان

آنتی اکسیدان¬ها باعث محافظت بدن در برابر تنش اکسیداتیو ناشی از رادیکال¬های آزاد می¬شوند. و از آنجا که موجودات آبزی منبعی فوق العاده برای کشف ترکیبات زیستی با خواص آنتی اکسیدانی جدید است. با توجه به این رویکرد، هدف از این مطالعه تخلیص و جداسازی اجزای پروتئینی عصاره¬ی آرتمیا ارومیانا ( به عنوان یک گونه-ی سخت پوست آبزی، بومی دریاچه¬ی ارومیه و به عنوان ذخیره¬ی ژنتیکی ایران) و بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی این نمونه¬ها بر روی سلولهای نوتروفیل خون محیطی انسان است. در این مطالعه آزمایشگاهی، پس از جدایی ناپولی¬ها از سیست آرتمیا ارومیانا، عصاره خام پروتئینی آن استخراج شد، سپس به وسیله کروماتوگرافی تعویض یونی تخلیص جزئی گردید، مقدار پروتئین تام هریک از فراکسیون¬های بدست آمده از ستون توسط روش برادفورد محاسبه شد و سپس میزان فعالیت آنتی اکسیدانی هر یک با استفاده از دو روش مهار رادیکال پایدار 2 و 2 دی فنیل - 1- پیکریل هیدرازیل (dpph) و ارزیابی قدرت احیا کنندگی، تعیین و با فعالیت آنتی اکسیدانی اسید آسکوربیک مقایسه گردید. در فاز دوم طرح، سلولهای نوتروفیل انسانی بعد از جداسازی، کشت داده شد و این سلولها با غلظت های افزایشی عصاره ی پروتئینی آرتمیا (شامل عصاره خام و فراکسیون¬های پروتئینی جدا شده از ستون کروماتوگرافی) به مدت حداکثر 24 ساعت تیمار شد سپس سلولها و محیط رویی سلولها به طور جداگانه جمع آوری و اثرات عصاره پروتئینی آرتمیا بر روی توانایی احیاء نیترو بلو تترازولیوم (nbt)، میزان فعالیت آنزیم سوپر اکساید دیسموتاز (sod) و مقدار نیتریک اکساید¬ها بررسی شد. نتایج حاصل به طور خلاصه به شرح زیر می¬باشد: 1- نتایج بدست آمده نشان داد که عدد ic50 (half maximal inhibitory concentration) مربوط به استاندارد اسید آسکوربیک، عصاره خام، فراکسیون¬های پروتئینی 1، 2، 3، 4، 5، 6، 7 و8 جدا شده از ستون کروماتوگرافی در مهار رادیکالdpph به ترتیب 17/81، 86/62، 150/04، 126/27، 140/7، 295/32، 299/33، 113/45،161/5 و 131/88 (µg)?(ml ) می¬باشد. قدرت احیا کنندگی در بالاترین غلظت (200µg/ml) براساس جذب نوری به ترتیب نمونه¬های ذکر شده،2/80 ، 1/39، 0/130،0/136 ، 0/169، 0/139، 0/133، 0/654، 0/183 و 0/342 می¬باشد. 2- توانایی احیاء nbt و تولید نیتریک اکساید¬ها در سلول¬های تیمار شده با عصاره پروتئینی آرتمیا ارومیانا اختلاف زیادی را با سلول¬های کنترل نشان نمی¬دهد. 3- فعالیت آنزیم سوپر اکساید دیسموتاز سلول¬های تیمار شده با عصاره خام فقط در غلظت 100µg/ml با p< 0/05 دارای اختلاف معنی دار است. سلول¬های تیمار شده با فراکسیون¬های 2، 3، 4 و 5 جدا شده از ستون کروماتوگرافی در غلظت¬های 50 و 100µg/ml نسبت به سلول کنترل با p< 0/05 دارای اختلاف معنی¬دار است.